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  • 酶底物檢測方法
  • 酶底物檢測方法

酶底物法MUG試劑-總大腸專用


介紹

      酶底物法檢測試劑可以同時檢測水中總大腸菌群和大腸埃希氏菌或者耐熱()大腸菌群,GB/5750.122006標準檢驗方法,如果水樣中存在總大腸或者耐熱()大腸菌群,則它的特異性代謝產物與試劑( MMO-MUG培養基)的主要成分0NPG反應,使溶液顯黃色;如水樣中有大腸埃希氏菌,則它的特異性代謝產物與MM0MUG培養基中的MUG反應使溶液顯熒光。并且可以在24小時內同時檢測出總大腸菌群和大腸埃希氏菌或者耐熱()大腸菌群,并可以抑制100m水樣中的2百萬個雜菌干擾,最低檢出限為1ctu(總大腸菌群和大腸埃希氏菌或者耐熱()大腸菌群)/100m水樣。

包裝

每包裝100個檢測試劑,用于檢測100mL水樣。

儲存條件

2-30°0避光儲存。

定性檢測

1.將一個包裝試劑倒入裝有100m水樣的無菌取樣瓶中。

2.蓋上蓋子,搖勻。

3.放在36±1℃培養24小時;或者放在44.5±0.2,培養24小時。

4.根據下表的說明判斷定性檢測結果。

定量檢測(用于檢測100m水樣)

1.將一個試劑倒入裝有100m水樣的無菌取樣瓶中。

2.蓋上蓋子,搖勻。

3.將水樣全部倒入51孔或97孔定量盤中,使用專用的程控定量封口機封口。

4.放在36±1℃培養24小時;或者放在44.5±0.2,培養24小時。

5.根據下表的說明讀取定量檢測結果,數出陽性格子數后對照MPN表得到定量檢測結果

檢測結果說明

現象

結果

36±144.5±0.2溫度下培養24小時,顏色比陽性對照物的黃色淺

總大腸菌群,大腸埃希氏菌陰性耐熱()大腸菌群陰性

36±1培養24小時,顏色與陽性對照物的黃色相同或者顏色更深

總大腸菌群為陽性

44.5±0.2℃培養24小時,顏色與陽性對照物的黃色相同或者顏色更深

耐熱()大腸菌群陽性

36±1℃培養24小時,顏色與陽性對照物的黃色相同或者顏色更深,且在紫外燈下顯熒光

大腸埃希氏菌為陽性

 

在暗室中,使用6,366nm的紫外燈在距樣品1厘米左右的位置觀測是否顯熒光。

結果應在24-28小時內讀取。此外,總大腸菌群和大腸埃希氏菌或耐熱()大腸菌群培養時間小于2小時已經為陽性;或總大腸菌群和大腸埃希氏菌或耐熱()大腸菌群大于28小時依然為陰性,則結果也有效。

實驗注意點

 檢測試劑可以使用多管法進行檢測。檢測結果可參閱《水與廢水檢驗標準測試方法》中的MPN

 如果水樣品有背景顏色,請做一個空白試驗,與檢測結果相比較

 如果水樣品被稀釋,則在讀取MPN表時乘以相應的稀釋倍數

 只可使用滅菌水,不含緩沖液的水,不含氧化劑的水進行樣品稀釋。

 試劑用于常規水樣檢測,不可以用于濃縮水樣。

 ⑥如果樣品中含有過多的氯,則加入科立得可能顯藍光,則該水樣不可用。

 無需在無菌室中進行但操作過程應避免微生物污染



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